2026-08-24 12:49:42
糖类是生物体和食品体系中最重要的一类基础分子,既包括葡萄糖、果糖、半乳糖、甘露糖、岩藻糖、木糖、阿拉伯糖等单糖,也包括蔗糖、乳糖、麦芽糖、海藻糖等二糖,以及低聚糖、糖醇、糖酸、氨基糖、糖磷酸、糖核苷酸、寡糖和复杂糖链。
虽然这些化合物统称为“糖类”,但它们的理化性质差异非常大。例如葡萄糖和果糖属于中性单糖,葡萄糖醛酸和唾液酸属于酸性糖,葡萄糖-6-磷酸和果糖-6-磷酸属于带磷酸基团的强极性糖代谢物,N-乙酰葡萄糖胺属于氨基糖,而HMO和N-糖链则属于结构高度复杂的寡糖。
因此,在实际实验中经常遇到一个非常重要的问题:
糖类检测到底应该选择HPLC、LC-MS,还是离子色谱?
这三类技术并不是简单的“高低级关系”,而是针对不同实验目的各有优势。
如果样本中的糖浓度较高、结构简单、主要做常规质量控制,HPLC-RI通常已经足够。
如果需要检测葡萄糖、果糖、半乳糖、甘露糖、木糖、糖醇以及多种低聚糖,并希望不进行衍生化,HPAEC-PAD类型的离子色谱往往具有明显优势。
如果研究对象来自血浆、尿液、细胞、组织、发酵液等复杂基质,同时需要高选择性、高灵敏度、稳定同位素内标和多指标同步定量,那么LC-MS/MS通常更加适合。
如果研究的是糖磷酸、糖酸、HMO、糖链、同分异构体或者低丰度糖代谢物,则需要进一步根据目标物结构选择HILIC-LC-MS、PGC-LC-MS、衍生化LC-MS或阴离子交换色谱。
本文围绕“糖类检测中HPLC、LC-MS、离子色谱如何选择”进行系统说明,重点比较HPLC-RI、HPLC-UV/FLD、HPLC-ELSD/CAD、HILIC-LC-MS/MS、PGC-LC-MS和HPAEC-PAD等技术,分析不同糖类、不同样本和不同实验目的下的方法选择逻辑,并介绍常用标准品、稳定同位素内标和衍生化试剂。
糖类分析看起来简单,但实际上属于分析化学中比较复杂的一类对象。
其主要原因首先是大量糖类结构非常相似。
例如:
葡萄糖、半乳糖和甘露糖具有相同分子式。
葡萄糖和果糖具有相同分子量。
木糖、阿拉伯糖和核糖也属于结构高度相似的五碳糖。
因此:
相同分子量并不能代表相同糖
第二个困难是很多糖缺少强紫外吸收基团。
普通有机小分子可以直接使用UV或DAD检测,但大多数糖在常规紫外波长下响应很弱,因此传统HPLC-UV通常不能直接获得理想灵敏度。
第三个困难是糖类高度亲水。
许多糖在普通C18反相色谱柱上的保留很弱。
第四个困难是糖容易产生异构体。
例如:
α-D-Glucose和β-D-Glucose属于异头体。
葡萄糖、半乳糖和甘露糖属于差向异构体。
3'-Sialyllactose和6'-Sialyllactose属于连接位置异构体。
因此糖类检测很多时候真正的难点并不是“检测到一个m/z”,而是:
把结构非常相似的糖真正分开。
目前科研和质量检测中最常见的糖类分析平台可以概括为三大类。
|
技术 |
常见检测器/联用方式 |
主要优势 |
|
HPLC |
RI、ELSD、CAD、UV、FLD |
成本较低、成熟、适合常规QC |
|
LC-MS |
Triple Quad、QTOF、Orbitrap |
灵敏度高、选择性高、可同位素定量 |
|
离子色谱 |
HPAEC-PAD、抑制电导 |
不衍生化分析糖和糖醇能力强 |
实际上很多所谓“糖类HPLC方法”,还可以进一步分成HPLC-RI、HPLC-ELSD、HPLC-CAD以及衍生化HPLC-UV/FLD。
而LC-MS也并不是一种单一方法,还可以进一步分成HILIC-LC-MS、PGC-LC-MS、Amide-LC-MS以及衍生化反相LC-MS/MS。
因此真正的方法选择应该根据目标糖、样本和研究目的来决定。
RI,即Refractive Index Detector,中文通常称示差折光检测器。
糖虽然没有明显紫外吸收,但是不同溶液的折光率不同,因此可以通过RI检测。
HPLC-RI长期用于以下项目:
葡萄糖、果糖、蔗糖、乳糖、麦芽糖、糖醇以及食品和发酵液中的主要糖组成。
HPLC-RI最大的优点是样本通常不需要进行复杂衍生化。
典型流程可以设计为:
样本提取-蛋白或颗粒物去除-过滤-糖柱或氨基柱分离-RI检测-标准曲线定量
对于食品、饮料、乳制品、发酵产品、糖浆和糖原料等高浓度样本,这一方法具有成本低、操作简单和重复性好的优势。
RI并不是所有糖类实验的最佳方案。
第一个局限是灵敏度相对较低。
如果目标糖在μM甚至更低水平,RI通常不如LC-MS/MS。
第二个局限是对温度非常敏感。
柱温、检测器温度和环境温度变化都可能导致基线漂移。
第三个局限是传统RI通常不适合复杂梯度洗脱。
这限制了它处理复杂糖混合物的能力。
第四个局限是选择性主要依赖色谱分离。
如果两个糖没有被色谱柱真正分开,RI检测器本身没有额外的结构鉴别能力。
因此:
高浓度+结构较简单+样本较干净-HPLC-RI非常合适
而:
低浓度+复杂基质+结构相似糖较多-LC-MS或HPAEC-PAD更加合适
天然糖类一般不适合直接进行普通UV检测。
因此HPLC-UV分析糖类时通常需要进行衍生化。
常见方法包括:
PMP衍生化、PITC衍生化以及其他能够引入紫外吸收基团的试剂。
PMP全称1-Phenyl-3-methyl-5-pyrazolone,是糖类分析中非常经典的衍生化试剂。
PMP可以与还原性糖反应,引入明显紫外吸收基团。
典型流程可以设计为:
单糖或多糖水解液-PMP衍生化-反应终止-去除过量PMP-C18反相HPLC分离-UV/DAD检测-标准品定性定量
PMP-HPLC尤其常见于:
植物多糖、中药多糖、真菌多糖、食品多糖以及天然产物多糖的单糖组成分析。
PMP-HPLC最大的优势是普通实验室只需要配置常规HPLC-UV即可开展。
适合检测的单糖通常包括:
甘露糖、核糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖、岩藻糖等。
典型实验流程为:
多糖样本-酸水解释放单糖-中和或去酸-PMP衍生化-有机溶剂去除过量PMP-过滤-HPLC-UV分析-与单糖标准品比较
因此,如果课题主要是:
多糖单糖组成分析
并且实验室没有质谱和离子色谱,PMP-HPLC仍然是非常实用的方法。
PMP方法的主要问题不是检测器,而是衍生化。
首先,衍生化反应增加实验步骤。
其次,过量PMP必须充分去除,否则会出现巨大试剂峰。
再次,不同糖的反应效率可能存在差异。
另外,还原糖和非还原糖的反应行为不同。
因此需要严格控制:
PMP浓度-反应pH-反应温度-反应时间-萃取次数-标准品和样本处理一致性
对于需要高精度绝对定量的研究,建议进一步加入稳定同位素内标或者改用LC-MS/MS。
糖链、氨基糖或者其他糖类可以通过引入荧光标签后进行HPLC-FLD检测。
常见标签包括:
2-AB、2-AA、Procainamide和APTS等。
例如N-糖链Released glycan profiling中,可以采用:
糖蛋白-PNGase F释放N-糖链-2-AB或Procainamide标记-HILIC-UPLC-FLR分析
相比普通UV检测,荧光检测通常具有更高灵敏度。
因此HPLC-FLD特别适合:
糖链、寡糖以及经过荧光衍生化处理的糖类分析。
ELSD为Evaporative Light Scattering Detector。
CAD为Charged Aerosol Detector。
这两种检测器都不依赖糖本身的紫外吸收。
因此对于:
糖、糖醇、低聚糖以及其他缺乏UV吸收的物质,都可以使用。
与RI相比,ELSD和CAD通常更加适合梯度洗脱。
这对于复杂低聚糖混合物具有一定优势。
但是这两种检测方式也存在问题。
首先,响应并不一定与浓度完全线性。
其次,不同化合物响应因子不同。
再次,流动相中不能存在大量难挥发盐。
因此如果进行严格绝对定量,仍然需要每一种目标糖分别建立标准曲线。
当研究对象来自复杂生物样本时,LC-MS的优势会明显增加。
例如:
血浆、血清、尿液、脑脊液、细胞、组织、粪便、发酵液以及微生物培养物。
这些样本中目标糖的浓度可能较低,同时还存在大量其他代谢物。
LC-MS可以同时提供:
保留时间、母离子质量、同位素分布以及MS/MS碎片。
因此其选择性明显高于RI。
如果再加入稳定同位素内标,可以进一步校正:
样本提取损失、衍生化损失、基质效应和仪器响应变化。
因此:
复杂生物样本+低浓度糖+需要高精度定量-LC-MS/MS通常是优先选择
糖类极性很强,在普通C18上往往保留不足。
HILIC,即Hydrophilic Interaction Liquid Chromatography,正好适合高度亲水小分子。
典型分析流程可以设计为:
样本提取-蛋白沉淀或净化-加入稳定同位素内标-HILIC分离-ESI-MS/MS检测-标准曲线定量
HILIC适合:
单糖、糖醇、氨基糖、糖磷酸、部分寡糖以及其他极性糖代谢物。
但HILIC并不意味着所有糖异构体都会自动分开。
对于葡萄糖、半乳糖、甘露糖等同质量异构体,仍需要针对色谱柱、流动相、添加剂和梯度进行优化。
天然糖在ESI-MS中虽然可以检测,但经常存在几个问题。
第一,离子化效率不高。
第二,很多结构异构体难以分离。
第三,保留时间较短。
第四,某些糖的MS/MS碎片缺少足够结构特异性。
因此可以通过衍生化改善这些问题。
典型技术路线为:
糖样本-加入稳定同位素内标-化学衍生化-增加疏水性或离子化基团-C18反相LC分离-MS/MS检测
常见衍生化试剂包括PMP、2-AA、2-AB、Procainamide以及部分专用于羰基或氨基糖的试剂。
衍生化后的糖往往能够从HILIC转移到更加稳定成熟的反相LC体系。
HPLC更多依赖:
色谱保留时间+检测器响应
而LC-MS可以同时利用:
色谱保留时间+m/z+MS/MS碎片
因此在复杂样本中,LC-MS具有明显优势。
例如两个化合物即使色谱峰比较接近,只要具有不同母离子或者不同碎片,仍然有机会进行选择性检测。
但是需要注意:
如果两个糖是完全同质量异构体,例如葡萄糖和半乳糖,那么仅仅有MS仍然不够。
仍然需要:
色谱真正分离
或者:
衍生化后产生不同保留行为/碎片
所以不能简单认为:
“上了质谱就不需要分离。”
稳定同位素内标与目标糖具有非常接近的化学性质。
例如检测D-Glucose时,可以使用:
D-Glucose-U-13C6。
检测D-Galactose时,可以使用:
D-Galactose-U-13C6。
检测L-Fucose时,可以使用:
L-Fucose-U-13C6。
内标与目标物共同经历:
样本提取-转移-衍生化-LC分离-离子化-MS检测
因此能够校正多个实验误差。
典型同位素稀释定量流程为:
样本-加入稳定同位素内标-前处理或衍生化-LC-MS/MS检测-目标物峰面积/内标峰面积-标准曲线-计算实际浓度
对于血浆、尿液、组织和细胞等复杂基质,这通常比普通外标法更加可靠。
传统意义上的离子色谱主要用于无机阴阳离子分析。
但是糖类在强碱条件下可以发生去质子化,形成阴离子形式,因此可以采用高效阴离子交换色谱进行分离。
最经典的糖类离子色谱技术之一是:
HPAEC-PAD
全称:
High-Performance Anion-Exchange Chromatography with Pulsed Amperometric Detection。
即:
高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测。
这种技术对于糖类分析具有非常独特的优势。
糖在普通中性条件下不容易带电。
但是在强碱条件下,糖分子的羟基可以部分去质子化。
形成阴离子以后,就可以在阴离子交换固定相上发生不同程度的保留。
随后通过PAD检测。
PAD能够对糖类在金电极表面发生的电化学氧化过程进行检测。
因此不需要像PMP-HPLC那样提前加入紫外标签。
典型流程可以表示为:
样本提取-过滤或适度净化-直接进HPAEC系统-阴离子交换分离-PAD检测-标准曲线定量
这也是HPAEC-PAD最大的优势之一:
糖可以不衍生化直接检测。
HPAEC-PAD特别适合检测:
单糖、二糖、部分低聚糖、糖醇、氨基糖以及多糖水解后的单糖组成。
典型单糖包括:
葡萄糖、半乳糖、甘露糖、岩藻糖、木糖、阿拉伯糖、核糖和鼠李糖。
典型二糖包括:
蔗糖、乳糖、麦芽糖、海藻糖和纤维二糖。
低聚糖方面可以分析:
麦芽寡糖、部分FOS、部分GOS以及其他寡糖体系。
对于糖醇,可检测:
山梨醇、甘露醇、木糖醇、赤藓糖醇等。
因此HPAEC-PAD特别适合:
多糖单糖组成分析-食品糖组成-低聚糖分析-糖醇分析
PMP-HPLC需要经过:
水解-PMP衍生化-去除过量PMP-HPLC检测
而HPAEC-PAD可以采用:
水解-中和/净化-离子色谱直接检测
因此在大量单糖组成样本中,HPAEC-PAD可以减少衍生化误差和工作量。
另外,HPAEC对一些结构相似单糖具有比较好的分离能力。
但是HPAEC-PAD也不是没有问题。
强碱流动相容易吸收空气中的CO2形成碳酸盐。
电极状态会影响PAD响应。
复杂样本中的盐和高浓度杂质也可能影响色谱和电极。
因此需要严格控制流动相配置和系统维护。
可以。
葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖酸以及其他糖酸本身具有羧基,因此更容易以离子形式存在。
它们可以采用阴离子交换色谱进行分离。
对于某些有机酸和糖酸,可以采用:
阴离子交换-抑制电导。
而对于糖类和部分糖酸,也可以采用PAD。
因此离子色谱不仅适合中性糖,还可以覆盖:
糖酸-氨基糖-部分糖磷酸-糖醇
但不同类别的最优色谱柱和检测器可能不同。
糖磷酸属于特别强极性和带负电的小分子。
代表性物质包括:
Glucose-6-phosphate、Fructose-6-phosphate、Glucose-1-phosphate、Ribose-5-phosphate、Xylulose-5-phosphate等。
对于标准溶液或者工艺样品,阴离子交换色谱可以很好地分离糖磷酸。
但是在细胞代谢组学中,糖磷酸浓度低、同分异构体多,而且需要与其他代谢物同步检测。
这时通常更加推荐:
冷淬灭-极性代谢物提取-稳定同位素内标-HILIC或阴离子交换兼容LC-MS-MS/MS定量
因此:
纯度较高样本和离子分析-离子色谱具有优势
复杂细胞代谢和低丰度定量-LC-MS通常更加灵活
如果目标是食品、饮料和糖浆中的主要糖,并且浓度较高,可以优先考虑HPLC-RI。
典型流程:
食品样本-水提取-离心-过滤-HPLC-RI-Glucose/Fructose/Sucrose标准曲线
如果需要同时分析多种单糖、糖醇和低聚糖,而且希望不进行衍生化,可以考虑HPAEC-PAD。
如果目标糖浓度很低或者食品基质特别复杂,则可以采用LC-MS/MS。
因此没有必要为了检测百分含量级葡萄糖而强行使用质谱。
植物多糖、中药多糖、真菌多糖、细菌多糖和海洋多糖通常需要先水解成单糖。
常见技术路线主要有三种。
第一种:
多糖-酸水解-PMP衍生化-HPLC-UV
这一方案仪器普及率高,适合多数实验室。
第二种:
多糖-酸水解-HPAEC-PAD
不需要PMP衍生化,适合单糖组成分析。
第三种:
多糖-酸水解-稳定同位素内标-衍生化LC-MS/MS
适合低含量单糖、高精度定量以及复杂结构研究。
如果目标只是回答:
“这个多糖由哪些单糖组成,各占多少?”
HPAEC-PAD或者PMP-HPLC通常已经足够。
如果需要更高灵敏度、更多结构确认以及绝对定量,则LC-MS更加合适。
血浆中的葡萄糖浓度相对较高,如果只检测葡萄糖,临床化学方法并不需要LC-MS。
但是科研项目往往需要同时分析:
葡萄糖、果糖、半乳糖、甘露糖、岩藻糖、糖醇、糖酸以及糖磷酸。
这时样本基质复杂,同时目标物浓度跨度很大。
更推荐:
血浆样本-加入13C稳定同位素内标-蛋白沉淀-必要时衍生化-HILIC或反相LC-MS/MS-同位素稀释定量
如果只使用RI,很难获得足够选择性和灵敏度。
尿液中可能存在葡萄糖、半乳糖、果糖、木糖、糖醇、糖酸和其他异常代谢糖。
如果用于遗传代谢病或代谢异常研究,LC-MS/MS可以提供更高选择性。
HPAEC-PAD也非常适合多种尿糖的直接筛查。
方法选择主要取决于实验目标。
多种糖整体筛查-HPAEC-PAD具有优势
指定糖高灵敏定量-LC-MS/MS具有优势
高浓度常规糖测定-HPLC或临床生化方法即可
发酵体系经常需要同时检测:
底物糖消耗和代谢产物生成。
例如:
葡萄糖、果糖、蔗糖、乳糖、木糖、阿拉伯糖以及糖醇。
如果浓度较高并且主要用于工艺监控,可以采用HPLC-RI。
流程为:
发酵液-离心去菌体-过滤-HPLC-RI-底物和主要产物定量
如果需要检测低浓度副产物、糖磷酸或者胞内代谢通量,则需要LC-MS/MS。
如果底物是复杂低聚糖,则HPAEC-PAD也具有明显优势。
低聚糖比单糖复杂,因为随着聚合度增加,同分异构体数量迅速增加。
对于麦芽寡糖等相对规则体系,HPAEC-PAD具有很好的应用价值。
例如:
Glucose-Maltose-Maltotriose-Maltotetraose-Maltopentaose-Maltohexaose-Maltoheptaose
可以形成相对规则的聚合度梯度。
对于HMO、复杂GOS、乳糖衍生寡糖以及结构异构体,则通常更加推荐LC-MS。
尤其HMO经常同时存在:
2'-FL、3-FL、LNT、LNnT、3'-SL、6'-SL等结构。
这类物质不仅存在质量不同的分子,也存在同质量结构异构体。
因此需要:
高分辨色谱+MS/MS+标准品
共同鉴定。
Human Milk Oligosaccharides结构复杂,存在大量岩藻糖化、唾液酸化以及连接异构体。
例如:
LNT和LNnT具有非常相近甚至相同组成,但是连接方式不同。
3'-SL和6'-SL同样只是Neu5Ac连接位置不同。
因此单纯RI基本不能提供足够结构信息。
更适合的技术路线包括:
HMO提取-HILIC或PGC分离-LC-MS/MS-标准品保留时间比对-MS/MS结构确认
如果需要绝对定量,可以进一步加入对应13C或氘代HMO内标。
糖链分析和普通单糖分析差别很大。
对于Released N-glycan,常用:
PNGase F释放-2-AB/Procainamide/RFMS标记-HILIC-UPLC-FLR-MS
如果需要连接异构体和更深结构解析,可以采用:
PGC-LC-MS/MS
对于O-glycan,则需要根据释放方式和糖链结构选择相应方法。
因此复杂糖链通常属于LC-MS优势领域,而不是普通RI检测范围。
PGC,即Porous Graphitized Carbon,多孔石墨化碳。
PGC对糖结构、连接方式和立体构型非常敏感,因此对部分糖异构体具有很好的分离能力。
常用于:
寡糖、糖链、唾液酸连接异构体以及其他结构糖研究。
对于以下问题:
同分子量但连接方式不同
PGC往往比单纯依靠MS更加有价值。
但PGC方法开发难度相对更高,部分糖还可能出现较强保留或者峰形问题,因此需要根据具体结构优化。
|
检测对象 |
优先考虑的方法 |
|
食品中高浓度Glucose/Fructose/Sucrose |
HPLC-RI |
|
乳制品Lactose/Glucose/Galactose |
HPLC-RI或HPAEC-PAD |
|
多糖水解后单糖组成 |
HPAEC-PAD或PMP-HPLC |
|
血浆低丰度糖 |
LC-MS/MS |
|
细胞糖代谢物 |
LC-MS/MS |
|
糖磷酸 |
LC-MS/MS或阴离子交换IC |
|
糖醇组合 |
HPAEC-PAD |
|
麦芽寡糖 |
HPAEC-PAD |
|
HMO |
HILIC/PGC-LC-MS |
|
N-糖链 |
HILIC-FLR-MS |
|
唾液酸及连接异构体 |
LC-MS/PGC或专门衍生化 |
|
糖酸 |
IC或LC-MS |
|
常规工业糖质量控制 |
HPLC-RI |
|
复杂科研样本绝对定量 |
LC-MS/MS+稳定同位素内标 |
如果实验室同时拥有HPLC、LC-MS和离子色谱,最合理的做法不是把所有样本都放到最贵的仪器上。
可以按照检测任务分层。
第一层为常规质量控制。
使用:
HPLC-RI
处理高浓度、结构简单的食品糖、培养基糖和发酵底物。
第二层为广谱单糖和糖醇分析。
使用:
HPAEC-PAD
处理多糖水解液、食品单糖、糖醇和低聚糖。
第三层为高灵敏科研定量。
使用:
LC-MS/MS+稳定同位素内标
处理血浆、尿液、细胞、组织和低丰度糖代谢物。
第四层为复杂结构糖研究。
使用:
HILIC/PGC-HRMS-MS/MS
处理HMO、N-glycan以及复杂寡糖。
这样可以最大程度发挥不同平台优势,同时降低运行成本。
无论使用哪一种技术,糖类分析都必须高度重视标准品。
对于HPLC-RI:
标准品主要用于确认保留时间和建立标准曲线。
对于HPAEC-PAD:
标准品除了定量,还特别用于确认结构异构体的色谱位置。
对于LC-MS:
标准品需要同时提供保留时间、母离子、碎片离子和定量响应。
因此:
同分异构糖不能只根据分子量确定结构。
例如检测Glucose、Galactose和Mannose时,最好分别配置三个标准品。
检测3'-SL和6'-SL时,也必须分别使用标准品确认。
对于常规单糖分析,可以建立一套基础混标:
Glucose-Galactose-Mannose-Fructose-Xylose-Arabinose-Ribose-Rhamnose-Fucose
对于多糖组成分析,可以进一步加入:
Glucuronic acid-Galacturonic acid-GlcNAc-GalNAc
对于食品糖分析,可以建立:
Glucose-Fructose-Sucrose-Lactose-Maltose-Trehalose
对于糖醇分析,可以建立:
Sorbitol-Mannitol-Xylitol-Erythritol-Ribitol-Arabitol
对于糖磷酸代谢组,可以建立:
G1P-G6P-F6P-R5P-X5P
这样比临时单独配置标准品更加有利于方法开发和系统适用性验证。
LC-MS/MS中最理想的内标是:
目标糖本身的稳定同位素标记物
例如:
Glucose-13C6对应Glucose。
Galactose-13C6对应Galactose。
Mannose-13C6对应Mannose。
Fucose-13C6对应Fucose。
GlcNAc-13C标记物对应GlcNAc。
这种方式属于结构完全匹配内标。
如果每一种目标物都无法获得对应内标,也可以按照结构类别选择代表性内标。
但是应注意:
葡萄糖、糖醇、糖酸和糖磷酸之间的基质效应与离子化行为差异较大,因此一个Glucose-13C6不适合校正所有糖类。
不同仪器对样本基质的耐受程度不同。
HPLC-RI对结构选择性有限,因此样本越复杂,对前处理要求越高。
HPAEC-PAD容易受到高盐和复杂离子基质影响,因此复杂生物样本通常需要适当脱盐和净化。
LC-MS虽然选择性高,但容易出现离子抑制,因此同样需要蛋白沉淀、SPE或者其他净化步骤。
因此方法选择必须同时考虑:
目标物+样本基质
而不能只看目标物。
一个基础血浆糖类靶向检测流程可以设计为:
血浆样本-加入稳定同位素内标-加入甲醇或乙腈沉淀蛋白-涡旋混匀-低温离心-取上清-必要时浓缩或衍生化-HILIC/反相LC-MS/MS-标准曲线定量
如果目标是糖磷酸,则要更加注意代谢物稳定性和低温淬灭。
如果目标是游离单糖,则要避免样本采集以后继续发生细胞代谢。
细胞糖代谢物变化速度非常快。
因此采样阶段必须快速终止代谢。
典型流程可以设计为:
细胞培养-处理组/对照组-快速去除培养液-低温淬灭-加入稳定同位素内标-极性代谢物提取-离心-上清浓缩或直接分析-HILIC-LC-MS/MS
如果研究的是13C示踪,则流程进一步变成:
13C-Glucose或其他示踪底物培养-设定时间点快速淬灭-代谢物提取-LC-HRMS或LC-MS/MS-分析M+0、M+1、M+2等同位素体-计算碳流分布
这与普通稳定同位素内标定量属于两个不同概念。
HPLC-RI通常仪器成本和维护成本最低。
HPAEC-PAD仪器和专用柱成本高于普通HPLC,但是不需要大量衍生化操作,对于长期进行单糖和糖醇分析的实验室效率很高。
LC-MS仪器成本、维护成本和方法开发成本最高,但是能够获得最高的选择性和灵敏度。
因此:
几十到几百个高浓度食品样本-HPLC-RI可能最经济
大量多糖单糖组成样本-HPAEC-PAD可能效率最高
几十个珍贵血浆或组织科研样本-LC-MS的价值最高
不能单纯按照仪器价格判断方法好坏。
|
指标 |
HPLC-RI |
HPAEC-PAD |
LC-MS/MS |
|
无衍生化能力 |
高 |
很高 |
高 |
|
灵敏度 |
中低 |
高 |
很高 |
|
复杂基质适应性 |
中低 |
中 |
很高 |
|
同分异构体分离 |
主要依赖色谱 |
较强 |
色谱+MS |
|
结构确认能力 |
较低 |
中等 |
很高 |
|
稳定同位素内标 |
很少使用 |
很少使用 |
非常适合 |
|
梯度能力 |
RI有限 |
强 |
强 |
|
高通量常规QC |
高 |
高 |
中 |
|
低丰度科研检测 |
低 |
中高 |
很高 |
|
运行成本 |
低 |
中 |
高 |
因此不存在一个平台在所有维度都最好。
RI对温度和流动相组成非常敏感。
常见原因包括:
柱温不稳定、检测器没有充分平衡、流动相脱气不充分、泵比例波动以及样本溶剂与流动相不匹配。
因此RI系统开始分析前通常需要充分平衡。
最常见原因是过量PMP没有清除干净。
另外也可能与反应pH不适合、萃取不足或者样本中存在其他羰基化合物有关。
可以采用:
优化PMP用量-反应后重复有机相萃取-设置PMP试剂空白-比较空白与样本色谱图
判断干扰来源。
PAD检测依赖电极表面状态。
长期运行以后,电极污染、流动相碳酸盐污染、样本基质污染以及系统条件变化都可能导致响应下降。
因此需要做好:
流动相防CO2污染、柱系统清洗、电极维护以及标准品QC监控。
因为三者属于结构异构体,具有相同分子式和相同分子量。
如果色谱没有真正分开,即使使用高分辨质谱,也不能仅凭准确质量可靠区分。
解决路线通常是:
更换HILIC或专用糖柱-优化流动相-采用衍生化改善分离-使用标准品确认保留时间-必要时采用特征MS/MS
还原糖在溶液中可能存在α和β异头体,并通过开链结构发生Mutarotation。
因此部分色谱条件下可能观察到两个相关峰。
方法开发时需要判断:
两个峰是否属于同一化合物的异头体
还是:
真正存在两个结构不同的糖。
可以通过标准品单独进样和改变平衡时间进行验证。
RI响应主要与溶液折光性质有关。
LC-MS响应则受到离子化效率、基质效应和加合离子影响。
不同糖的MS响应因子可能差异很大。
因此不能简单使用一个糖的响应因子去计算其他糖。
如果需要绝对定量:
每一种糖建立标准曲线+尽量使用对应稳定同位素内标
是更加可靠的方法。
如果目标是建立基础单糖方法,可以优先配置:
Glucose-Fructose-Galactose-Mannose-Fucose-Xylose-Arabinose-Ribose-Rhamnose
如果目标是多糖单糖组成,则增加:
Glucuronic acid-Galacturonic acid-GlcNAc-GalNAc
如果目标是食品糖,则增加:
Sucrose-Lactose-Maltose-Trehalose-Cellobiose-Raffinose-Stachyose
如果目标是糖醇,则增加:
Sorbitol-Mannitol-Xylitol-Erythritol-Ribitol-Arabitol
这样基本可以建立一个比较完整的常规糖类分析标准体系。
基础内标可以优先从以下几类开始。
单糖内标:
Glucose-U-13C6-Galactose-U-13C6-Mannose-U-13C6-Fructose-U-13C6-Fucose-U-13C6
五碳糖内标:
Ribose-U-13C5-Xylose-U-13C5-Arabinose-U-13C5
氨基糖内标:
GlcNAc-13C labeled-GalNAc-13C labeled
糖醇内标:
Sorbitol-13C6-Mannitol-13C6-Xylitol-13C5
糖酸内标:
Gluconic acid-13C6-Glucuronic acid-13C6
糖磷酸内标:
Glucose-6-phosphate-13C6-Fructose-6-phosphate-13C6-Ribose-5-phosphate-13C5
这样可以覆盖大部分糖代谢和靶向糖组研究。
如果面对一个新的糖类检测项目,可以按照四个问题进行判断。
第一,目标糖浓度高不高?
浓度高可以优先考虑HPLC或IC,浓度很低优先考虑LC-MS。
第二,样本复杂不复杂?
纯标准品、食品和工艺样本可以使用HPLC或IC;血浆、组织和细胞更适合LC-MS。
第三,目标物有没有很多结构异构体?
异构体多时,优先考虑HPAEC、PGC或者经过优化的LC-MS。
第四,是否要求真正高精度绝对定量?
如果要求高准确度、低浓度和复杂基质,优先采用稳定同位素稀释LC-MS/MS。
糖类检测中,HPLC、LC-MS和离子色谱并不存在简单的“哪一个最好”,真正重要的是根据目标物结构、样本基质、检测浓度和实验目的选择适合的平台。
对于食品、饮料、乳制品、糖浆、培养基和发酵液中浓度较高的葡萄糖、果糖、蔗糖、乳糖和麦芽糖,HPLC-RI具有方法成熟、样本处理简单和成本低等优势。
对于植物多糖、中药多糖、真菌多糖以及其他天然多糖的单糖组成分析,可以采用PMP-HPLC-UV,也可以使用HPAEC-PAD。前者适合拥有普通HPLC的实验室,后者不需要PMP衍生化,并且对多种单糖和糖醇具有良好的分析能力。
对于血浆、尿液、细胞、组织以及其他复杂生物样本中的低丰度糖代谢物,LC-MS/MS具有明显优势。尤其结合13C稳定同位素内标以后,可以同时校正提取损失、基质效应和仪器响应变化。
对于糖磷酸、糖酸和其他强极性离子型糖,可以根据样本类型在阴离子交换离子色谱和LC-MS之间选择。
对于HMO、N-糖链和复杂寡糖,则应重点考虑HILIC-LC-MS、PGC-LC-MS以及荧光标记LC-MS等结构分析平台。
总体上可以形成一个非常实用的选择逻辑:
高浓度常规糖质量控制-HPLC-RI
多糖水解单糖和糖醇-HPAEC-PAD或PMP-HPLC
复杂生物样本低丰度糖-LC-MS/MS
糖磷酸和糖酸-离子色谱或LC-MS
HMO和复杂糖链-HILIC/PGC-LC-MS
高精度绝对定量-LC-MS/MS+稳定同位素内标
因此,实验室建立糖类检测平台时,最理想的策略并不是寻找一种方法覆盖所有糖,而是根据糖类化学性质建立分层技术体系,在HPLC、离子色谱和LC-MS之间进行合理分工。
| 中文名 | 英文名 | CAS | 规格 | 纯度 | 货期 | 品牌 |
| D-葡萄糖 | D-Glucose | 50-99-7 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| D-果糖 | D-Fructose | 57-48-7 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| D-半乳糖 | D-Galactose | 59-23-4 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| D-甘露糖 | D-Mannose | 3458-28-4 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| L-岩藻糖 | L-Fucose | 2438-80-4 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| D-木糖 | D-Xylose | 58-86-6 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| L-阿拉伯糖 | L-Arabinose | 5328-37-0 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| D-阿拉伯糖 | D-Arabinose | 10323-20-3 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| D-核糖 | D-Ribose | 50-69-1 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| L-鼠李糖一水合物 | L-Rhamnose monohydrate | 10030-85-0 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| D-阿洛糖 | D-Allose | 2595-97-3 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| D-阿卓糖 | D-Altrose | N/A | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| D-阿洛酮糖 | D-Allulose / D-Psicose | 551-68-8 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| D-塔格糖 | D-Tagatose | 87-81-0 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| L-山梨糖 | L-Sorbose | 87-79-6 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| 蔗糖 | Sucrose | 57-50-1 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| 乳糖 | Lactose | 63-42-3 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| 麦芽糖 | Maltose | 69-79-4 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| 海藻糖 | Trehalose | 99-20-7 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| 纤维二糖 | Cellobiose | 528-50-7 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| 蜜二糖 | Melibiose | 585-99-9 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| 异麦芽糖 | Isomaltose | 499-40-1 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| 乳果糖 | Lactulose | 4618-18-2 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| 棉子糖 | Raffinose | 512-69-6 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| 水苏糖 | Stachyose | 54261-98-2 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| 毛蕊花糖 | Verbascose | N/A | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| 麦芽三糖 | Maltotriose | 1109-28-0 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| 麦芽四糖 | Maltotetraose | N/A | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| 麦芽五糖 | Maltopentaose | N/A | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| 麦芽六糖 | Maltohexaose | N/A | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| 麦芽七糖 | Maltoheptaose | N/A | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| 低聚果糖 | Fructooligosaccharides / FOS | 混合物/以COA为准 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| 低聚半乳糖 | Galactooligosaccharides / GOS | 混合物/以COA为准 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| 菊粉 | Inulin | 9005-80-5 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| 麦芽糊精 | Maltodextrin | 9050-36-6 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| 山梨醇 | D-Sorbitol / Sorbitol | 50-70-4 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| 甘露醇 | D-Mannitol | 69-65-8 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| 木糖醇 | Xylitol | 87-99-0 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| 赤藓糖醇 | Erythritol | 149-32-6 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| 核糖醇 | Ribitol | 488-81-3 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| 阿拉伯糖醇 | Arabitol | 待确认/异构体以COA为准 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| 麦芽糖醇 | Maltitol | 585-88-6 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| 乳糖醇 | Lactitol | 585-86-4 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| 肌醇 | Myo-Inositol | 87-89-8 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| D-葡萄糖酸 | D-Gluconic acid | 526-95-4 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| D-葡萄糖醛酸 | D-Glucuronic acid | 1700908 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| D-半乳糖醛酸 | D-Galacturonic acid | 待确认/水合形式以COA为准 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| L-艾杜糖醛酸 | L-Iduronic acid | N/A | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| N-乙酰神经氨酸 | N-Acetylneuraminic acid / Neu5Ac | 131-48-6 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| N-羟乙酰神经氨酸 | N-Glycolylneuraminic acid / Neu5Gc | 1113-83-3 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| D-葡萄糖胺盐酸盐 | D-Glucosamine hydrochloride | 66-84-2 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| D-半乳糖胺盐酸盐 | D-Galactosamine hydrochloride | 1772-03-8 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| N-乙酰-D-葡萄糖胺 | N-Acetyl-D-glucosamine / GlcNAc | 7512-17-6 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| N-乙酰-D-半乳糖胺 | N-Acetyl-D-galactosamine / GalNAc | 1811-31-0 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| 葡萄糖-1-磷酸 | Glucose-1-phosphate / G1P | 盐型N/A | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| 葡萄糖-6-磷酸 | Glucose-6-phosphate / G6P | 盐型N/A | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| 果糖-6-磷酸 | Fructose-6-phosphate / F6P | 盐型N/A | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| 果糖-1,6-二磷酸 | Fructose-1,6-bisphosphate / F1,6BP | 盐型N/A | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| 核糖-5-磷酸 | Ribose-5-phosphate / R5P | 盐型N/A | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| 核酮糖-5-磷酸 | Ribulose-5-phosphate / Ru5P | 盐型N/A | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| 木酮糖-5-磷酸 | Xylulose-5-phosphate / X5P | 盐型N/A | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| 2'-岩藻糖基乳糖 | 2'-Fucosyllactose / 2'-FL | 41263-94-9 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| 3-岩藻糖基乳糖 | 3-Fucosyllactose / 3-FL | 41312-47-4 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| 乳糖-N-四糖 | Lacto-N-tetraose / LNT | 14116-68-8 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| 乳糖-N-新四糖 | Lacto-N-neotetraose / LNnT | 13007-32-4 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| 3'-唾液酸乳糖 | 3'-Sialyllactose / 3'-SL | 35890-38-1 / 盐型待确认 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| 6'-唾液酸乳糖 | 6'-Sialyllactose / 6'-SL | 35890-39-2 / 盐型待确认 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| D-葡萄糖-U-13C6 | D-Glucose-U-13C6 | 110187-42-3 | 1mg/5mg/10mg | ≥98% | 现货 | isospex® |
| D-果糖-U-13C6 | D-Fructose-U-13C6 | N/A | 1mg/5mg/10mg | ≥98% | 现货 | isospex® |
| D-半乳糖-U-13C6 | D-Galactose-U-13C6 | 74134-89-7 | 1mg/5mg/10mg | ≥98% | 现货 | isospex® |
| D-甘露糖-U-13C6 | D-Mannose-U-13C6 | N/A | 1mg/5mg/10mg | ≥98% | 现货 | isospex® |
| L-岩藻糖-U-13C6 | L-Fucose-U-13C6 | N/A | 1mg/5mg/10mg | ≥98% | 现货 | isospex® |
| D-核糖-U-13C5 | D-Ribose-U-13C5 | N/A | 1mg/5mg/10mg | ≥98% | 现货 | isospex® |
| D-木糖-U-13C5 | D-Xylose-U-13C5 | N/A | 1mg/5mg/10mg | ≥98% | 现货 | isospex® |
| L-阿拉伯糖-U-13C5 | L-Arabinose-U-13C5 | N/A | 1mg/5mg/10mg | ≥98% | 现货 | isospex® |
| 蔗糖-U-13C12 | Sucrose-U-13C12 | N/A | 1mg/5mg/10mg | ≥98% | 现货 | isospex® |
| 乳糖-U-13C12 | Lactose-U-13C12 | N/A | 1mg/5mg/10mg | ≥98% | 现货 | isospex® |
| 麦芽糖-U-13C12 | Maltose-U-13C12 | N/A | 1mg/5mg/10mg | ≥98% | 现货 | isospex® |
| 山梨醇-13C6 | Sorbitol-13C6 | N/A | 1mg/5mg/10mg | ≥98% | 现货 | isospex® |
| 甘露醇-13C6 | Mannitol-13C6 | N/A | 1mg/5mg/10mg | ≥98% | 现货 | isospex® |
| 木糖醇-13C5 | Xylitol-13C5 | N/A | 1mg/5mg/10mg | ≥98% | 现货 | isospex® |
| 赤藓糖醇-13C4 | Erythritol-13C4 | N/A | 1mg/5mg/10mg | ≥98% | 现货 | isospex® |
| N-乙酰葡萄糖胺-U-13C标记 | N-Acetyl-D-glucosamine-U-13C labeled | N/A | 1mg/5mg/10mg | ≥98% | 现货 | isospex® |
| N-乙酰半乳糖胺-U-13C标记 | N-Acetyl-D-galactosamine-U-13C labeled | N/A | 1mg/5mg/10mg | ≥98% | 现货 | isospex® |
| N-乙酰神经氨酸-13C3 | Neu5Ac-13C3 | N/A | 1mg/5mg/10mg | ≥98% | 现货 | isospex® |
| N-乙酰神经氨酸-d3 | Neu5Ac-d3 | N/A | 1mg/5mg/10mg | ≥98% | 现货 | isospex® |
| N-羟乙酰神经氨酸-13C3 | Neu5Gc-13C3 | N/A | 1mg/5mg/10mg | ≥98% | 现货 | isospex® |
| 葡萄糖酸-13C6 | Gluconic acid-13C6 | N/A | 1mg/5mg/10mg | ≥98% | 现货 | isospex® |
| 葡萄糖醛酸-13C6 | Glucuronic acid-13C6 | N/A | 1mg/5mg/10mg | ≥98% | 现货 | isospex® |
| 葡萄糖-6-磷酸-13C6 | Glucose-6-phosphate-13C6 | 盐型N/A | 1mg/5mg/10mg | ≥98% | 现货 | isospex® |
| 葡萄糖-1-磷酸-13C6 | Glucose-1-phosphate-13C6 | 盐型N/A | 1mg/5mg/10mg | ≥98% | 现货 | isospex® |
| 果糖-6-磷酸-13C6 | Fructose-6-phosphate-13C6 | 盐型N/A | 1mg/5mg/10mg | ≥98% | 现货 | isospex® |
| 核糖-5-磷酸-13C5 | Ribose-5-phosphate-13C5 | 盐型N/A | 1mg/5mg/10mg | ≥98% | 现货 | isospex® |
| 2'-岩藻糖基乳糖-13C | 2'-Fucosyllactose-13C labeled | N/A | 1mg/5mg/10mg | ≥98% | 现货 | isospex® |
| 3-岩藻糖基乳糖-13C | 3-Fucosyllactose-13C labeled | N/A | 1mg/5mg/10mg | ≥98% | 现货 | isospex® |
| 乳糖-N-四糖-13C | Lacto-N-tetraose-13C labeled | N/A | 1mg/5mg/10mg | ≥98% | 现货 | isospex® |
| 乳糖-N-新四糖-13C | Lacto-N-neotetraose-13C labeled | N/A | 1mg/5mg/10mg | ≥98% | 现货 | isospex® |
| 3'-唾液酸乳糖-13C | 3'-Sialyllactose-13C labeled | N/A | 1mg/5mg/10mg | ≥98% | 现货 | isospex® |
| 6'-唾液酸乳糖-13C | 6'-Sialyllactose-13C labeled | N/A | 1mg/5mg/10mg | ≥98% | 现货 | isospex® |
| PMP | 1-Phenyl-3-methyl-5-pyrazolone | 89-25-8 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| 2-氨基苯甲酰胺 | 2-Aminobenzamide / 2-AB | 88-68-6 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| 2-氨基苯甲酸 | 2-Aminobenzoic acid / 2-AA | 118-92-3 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| 普鲁卡因胺 | Procainamide | 51-06-9 / 盐型另行确认 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| APTS | 8-Aminopyrene-1,3,6-trisulfonic acid | 待确认/盐型以COA为准 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| DMB | 1,2-Diamino-4,5-methylenedioxybenzene | N/A | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| 氰基硼氢化钠 | Sodium cyanoborohydride | 25895-60-7 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| 甲酸铵 | Ammonium formate | 540-69-2 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| 乙酸铵 | Ammonium acetate | 631-61-8 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| 甲酸 | Formic acid | 64-18-6 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| 乙腈 | Acetonitrile | 27522 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
| 甲醇 | Methanol | 67-56-1 | 10mg/50mg/100mg | ≥98% | 现货 | sogestandard® |
